Генетические маркеры бокового амиотрофического склероза в Российской Федерации
Генетические маркеры бокового амиотрофического склероза в Российской Федерации
Резюме
Авторы приводят краткий обзор имеющейся на сегоднящний день информации о генетике бокового амиотрофического склероза (БАС, а также описывают клинические примеры больных семейным БАС из России с мутациями в генах супероксиддсмутазы-1 (SOD1), ангиогенина (ANG), TDP-43 (TARDBP), VAPB, FUS, С9orf72.
Ключевые слова: боковой амиотрофический склероз, генетические маркеры,
Введение
Боковой амиотрофический склероз (БАС) – неуклонно прогрессирующее и смертельное нейродегенераративное заболевание, которое сопровождается поражением центральных и периферических мотонейронов, двигательным дефицитом, нарушениями речи, глотания, алиментарной и дыхательной недостаточностью.
Впервые генетическая природа БАС была доказана в 1993 году. С тех пор были открыты мутации в гене супероксиддисмутазы-1 (SOD1), генах липосаркомы (FUS/TLS), TDP-43/TARDBP, C9orf72, генах ангиогенина (ANG), везикуло-ассоциированного белка В (VAPB),FIG4,оптиневрина, валозин-содержащего белка, убиквилина-2, профилина-1, других (1-8).
В Российской Федерации генетика БАС в последний раз изучалась в 1999-2003 гг. В.И.Скворцовой,Г.Н.Левицким и соавторами. Были обнаружены мутации в гене SOD1 у больной крайне медленно прогрессирующим поясничным дебютом БАС в классическом варианте (гомозиготная D90A), а также у больной с типичным быстрым прогрессированием поясничного дебюта БАС в классическом варианте (гетерозиготная D90A). Мутации D90A впервые были открыты в Швеции P.M.Andersen (9). У обеих российских больных был обнаружен так называемый «скандинавский гаплотип», что привело к суждению о наличии другого неизвестного каузативного генетического или средового фактора БАС у второй пациентки (10,11). Также была описана пациентка с мутацией G12R с быстропрогрессирующим поясничным дебютом БАС в пирамидном варианте, при этом более пожилой возраст больной (62 года) и быстрый темп прогрессирования отличали её от выборки итальянских пациентов, у которых заболевание начиналось на четвертой декаде жизни и прогрессировало медленно (11-13).
Целью настоящего исследование было молекулярно-генетическое обследование больных БАС из российской популяции на предмет наличия мутаций в генах SOD1,ANG, TARDBP, VAPB, FUS и С9orf72.
Материалы и методы
В период с 2013 по 2015 гг. было обследовано 60 пациентов БАС.Диагноз БАС ставился по результатам неврологического осмотра в соответствии с Пересмотренными Эль-Эскориальскими критериями после проведения игольчатой и стимуляционной электромиографии и проведения магнитно-резонансной томографии отдела центральной нервной системы в проекции дебюта болезни и ростральнее (14). У 10 больных имело место сочетание БАС и лобно-височной деменции, диагноз которой ставился согласно критериям D.Neary (15). Дебют БАС диагностировался по классификации A.J.Hudson, вариант БАС – по классификации О.А.Хондкариана (16,17).Клиническое и нейрофизиологическое обследование проводилось на базе ООО КДЦ «Реал Хэлс», Москва (генеральный директор к.м.н. Г.Н.Левицкий).
Молекулярно-генетические методы
Выделение геномной ДНК проводили с помощью набора AxyPrepTM Blood Genomic DNA Miniprep Kit 250-prep (AXYGEN) из образцов периферической крови пациентов, взятых в пробирки с этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА).
Референсные последовательности исследованных генов были взяты из базы данных NCBI ( http://www.ncbi.nlm.nih.gov/ ). Были выбраны праймеры для амплификации и последующего прямого автоматического секвенирования всех экзонов, включая области экзон-интронных соединений генов SOD1, ANG, VAPB, FUS, TARDBP. Специфичность и качество праймеров проверяли с помощью OligoCalc (http://biotools.nubic.northwestern.edu/OligoCalc.html). Праймеры были синтезированы метоксифосфоамитидным методом в ЗАО «Евроген».
Амплификацию необходимых фрагментов геномной ДНК проводили методом ПЦР на программируемом термоциклере МС2 фирмы «ДНК-технология» (Россия) в 25l реакционной смеси следующего состава: 20-100 ng геномной ДНК или кДНК; по 0.25 М каждого оригинального олигопраймера; по 200М каждого нуклеозидтрифосфата; 1.0 единица активности ДНК-полимеразы Biotaq («Силекс»); буфер для ПЦР (67 mM Tris-HCl; 16.6 mM (NH4)2SO4; 0.01% Twin-20; рН 8.8); 3.0-4.0 mM MgCl2; 20-30 l минерального масла. Последовательности использованных праймеров и условия проведения PCR представлены в таблице 1. Амплификацию проводили в стандартных условиях при оптимальной температуре отжига. Для регистрации продуктов ПЦР использовали электрофорез в 3% агарозном геле в присутствии бромистого этидия с последующей визуализацией с помощью документирующей системы GelDoc фирмы BIO-RAD в УФ-излучении.
Таблица 1. Последовательность праймеров и PCR условия
Ген | Экзон | Последовательность праймеров (5'-3') | Температура отжига (oC) | Длина фрагмента (bp) |
SOD1
|
1
| 1F-tttgcgtcgtagtctcctgc |
63
|
189
|
1R-agcggcctcgcaaacaagc | ||||
2
| 2F-gctttttacttcactgtgagg |
62
|
256
| |
2R-gtttaggggctactctactg | ||||
3
| 3F-gaagtcgtgatgcaggtcag |
63
|
347
| |
3R-gcattccagcatttgggag | ||||
4
| 4F-aagccttgtttgaagagctg |
63
|
357
| |
4R-accgcgactaacaatcaaag | ||||
5
| 5F-gaggtagtgattacttgacag |
60
|
213
| |
5R-ctagcaggataacagatgag | ||||
FUS
|
1
| 1F-acttgtttcccttctgcctg |
60
|
312
|
1R-aaaacgaaaagcccagctgg | ||||
2-3
| 2F-catcagtgcttgagttaagg |
63
|
516
| |
3R-gaatcgtttgaacccggtag | ||||
4-5
| 4F-cactaacagcttctgagagg |
63
|
744
| |
5R-agcaacagagacagagcaag | ||||
6
| 6F-ttcattgcctggcacttgtc |
63
|
430
| |
6R-ctaaaccatgcactagggac | ||||
7
| 7F-aaaggtcagacaaggggtgg |
63
|
330
| |
7R-cctttctggaggtggttctg | ||||
8
| 8F-gaattttctcctctgggcag |
63
|
411
| |
8R-ccacaagccaggtatttctg | ||||
9-10
| 9F-tgataccagttgcttgatgg |
62
|
851
| |
10R-aaccctcaaactatggcttg | ||||
11-12
| 11F-actttagctgcggtttcagg |
62
|
625
| |
12R-aatctgaccccaacagtgtg | ||||
13-15
| 13F-tgaagcttcagtttcctcac |
63
|
884
| |
15R-gatcaggaattggaaggttac | ||||
ANG
|
1
| F-ggcctaatttggtgatgctg |
63
|
615
|
R-gcccttggcaatgaatgttg | ||||
VAPB
|
1
| 1F-aaaacttaaagcgggcgcag |
60
|
424
|
1R-acaaagtgacaagtgcctcg | ||||
2
| 2F-tcgtggatctcaaatcttcc |
62
|
356
| |
2R-atcttcttctgctacactgc | ||||
3
| 3F-aagacataagagaatgccgg |
63
|
517
| |
3R-tcgtggatctcaaatcttcc | ||||
4
| 4F-atatacatcagggctttctc |
60
|
270
| |
4R-ttttgcaggaaatggtatgc | ||||
5
| 5F-tggtgtttgctgagaactac |
62
|
351
| |
5R-ttcactggctcatcaacttc | ||||
6
| 6F-gtttctccgtttgcaaaatg |
60
|
358
| |
6R-taaatcccatgatatggtgg | ||||
TARDBP
|
1
| 1F-cagttattctgacatgaatg |
60
|
378
|
1R-aaaagaggctaagatccatg | ||||
2
| 2F-tctagatgtaggaggtagtg |
60
|
325
| |
2R-accccatctctatttatacc | ||||
3
| 3F-gcatccagttgaaaccattc |
60
|
383
| |
3R-gccaaagacttcaacaagac | ||||
4
| 4F-tggttcactgctatccaagg |
60
|
408
| |
4R-acggggtttcaccatgttg | ||||
5
| 5F-tgcccagcctatgtcttttg |
63
|
995
| |
5R-accaatcaggcaaacagcag |
Все фрагменты были секвенированы с обеих цепей ДНК с использованием Big Dye Terminator’s v 1.1 Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems, Foster City, CA) и генетического анализатора ABI PRISM 3500xl (Applied Biosystems), анализ результатов секвенирования проводили с помощью программы Chromas. Анализ выявленных изменений нуклеотидной последовательности проводили с помощью Nucleotide BLAST ( http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PAGE_TYPE=BlastSearch&BLAST_SPEC=OGP__9606__9558&LINK_LOC=blasthome# ) и баз данных HGMD (http://www.hgmd.cf.ac.uk/ac/index.php ), NCBI ( http://www.ncbi.nlm.nih.gov/ ) и Ensembl ( http://www.ensembl.org/index.html ).
Результаты.
Мутации в гене SOD1 выявлены у 2-х больных БАС и у 3-х родственников первой из них. Мутации в гене ANG выявлены у одной больной БАС и у её здорового сына. Мутация в гене VAPB выявлена у одного пациента с БАС. Мутация в гене TARDBP выявлена у одного пациента с БАС. Мутации гена C9orf72 не выявлены ни у одного больного БАС, с том числе с клиникой деменции.
Клинический случай №1.
Больная Р., 43 лет, больна в течение 3-х лет. Проживает с семьёй в Астраханской области. Заболевание началось со слабости в левой ноге. В неврологическом статусе общемозговых, менингеальных, когнитивных нарушений нет. Расстройств черепной иннервации нет. Тетрапарез до плегии в стопах, пареза до 2-3 баллов в передней группе мышц бедер, кистей с преобладанием в разгибателях, верхнем плечевом поясе с преобладанием слева. Сухожильные рефелксы с рук и коленные оживлены, ахилловы не вызываются. Патологически кистевые рефлексы Якобсона и Россолимо. Вызванные фасцикуляции в бедрах и плечах. Атрофии мышц ног, кистей, верхнего плечевого пояса. Чувствительность и тазовые функции не нарушены. Координация нарушена вторично за счет наличия парезов. Спирография не проводилась. Диагноз: Болезнь мотонейрона, БАС, поясничный дебют, классический вариант, быстрое прогрессирование.
Семейный анамнез. У больной была сестра, которая умерла от БАС в возрасте 43 лет, заболела в 39 лет. Имел место поясничный дебют БАС.У больной двое здоровых детей 11 и 15 лет. У сестры больной остался здоровый сын 14 лет. Родителям больной 63 и 67 лет, они здоровы.
У больной (3) и обоих её детей (1 и 2), а также у сына её покойной сестры (6), выявлена мутация в гене SOD1 c.50G>C (p.17Gly>Ala) CM983777 NM _000454.4 в гетерозиготном состоянии. У бабушки (4) и дедушки (5) больной, тёти больной (7) данной мутации в гене SOD1 не выявлено. Родители больной обследованы не были.
Рисунок 2. Родословная больной Р. С мутацией гена SOD1 c.50G>C (p.17Gly>Ala) CM983777.
Клинический случай № 2.
Больная Ц., 55 лет, проживает в г. Вязьма Смоленской области, жалуется на слабость в руках и ногах, эпизоды замедления речи и редкие поперхивания, сложно дышать лежа на спине, генерализованные мышечные подергивания, легкие нарушения сна, частую плаксивость. Заболела в феврале 2014 года со слабости в левой кисти
Обследована. При игольчатой ЭМГ - нейрональные изменения в мышцах рук и, в меньшей степени ног с признаками текущего ДРП. МРТ шейного отдела позвоночника – признаки остеохондроза , легкого правостороннего сколиоза, гемангиомы и\или жировые дистрофии тел позвонков шейного отдела –не описаны. Интрамедуллярных изменений нет. МРТ головного мозга – внутренняя гидроцефалия , кистозное перерождение эпифиза. УЗИ – диффузные изменения в печени и поджелудочной железе, хронический калькулезный холецистит. КТ грудной клетки – объемное образование переднего средостения (целомическая киста перикарда?вилочковой железы?). Рентгенография правого плечевого сустава –остеоартроз 2 ст, рентгенография коленей коленей-двусторонний гонартроз 1 ст.
Семейный анамнез: Мать больной умерла в возрасте 70 лет, были нарушения речи, поперхивания при глотании, трудности в самообслуживании, умерла после поперхивания. У больной дочь 33 лет и сыну 28 лет, отец больной умер после инсульта в 62 года, у больной есть сестра 59 лет, второй 60 лет, младшей 53 года, у них у всех есть здоровые дети. Бабушка по линии папы и дедушка по линии были долгожителями. Дедушка по линии погиб на войне в возрасте примерно 40 лет, бабушка по линии мамы умерла в возрасте 64 лет, страдала нарушениями ходьбы, нарушением движений в руках и одышкой.
При осмотре в неврологическом статусе: Общемозговых, менингеальных ,глазодвигательных нарушений, четких когнитивных нарушений нет (монреальскя шкала 27 б, норма 26-30, но было замедление фонетической активности 4\11) . Нарушений ЧМН нет. Рефлекс Маринеско с двух сторон. . В шее парезов нет. Плегия в разгибателях левой кисти и до 1 б в правой, в сгибателях кистей 2-3 б, больше слева, парез в бицепсах до 2-3 б, больше слева, в трицепсах до 3-4 б , больше слева, в дельтовидных слева 1 б, справа 3 б. В ягодичных мышцах 3-4 б больше слева. Грубые атрофии мышц рук. Единичные вызванные фасцикуляции в руках и ногах. Сухожильные рефлексы с рук и ног снижены,. Симптом Подошвенные рефлексы индифферентны. Координация и чувствительность не нарушена. Одышка в положении лежа
Спирография –ЖЕЛ умеренно снижена, ФЖЕЛ 51%. Значительное снижение вентиляционной функции легких по смешанному типу, рестрикция и умеренная обструкция верхних дыхательных путей, признаки дисфункции мягкого неба. Шкала депрессии Гамильтона-9 баллов (легкое тревожно-депрессивное расстройство)..Шкала качества жизни - двигательная активность 60 баллов (проблемы возникают часто), повседневная деятельность 75 б (проблемы часто), общение – 33,3баллов (проблемы редко), глотание – 28,5балл (проблемы редко), эмоциональный фон – 37,5 б (проблемы возникают редко), итого 234,3 баллов- проблемы возникают иногда
Антропометрия – правое плечо 29 см, левое 27 см, правое предплечье 20 см, левое -22 см (отек), правое бедро 48 см, левое 45 см, правая голень 36 см, левая 34 см. Левосторонняя гемиатрофия, отек правого предплечья
Электромиография- декремент тест при разночастотной стимуляции при частоте 3 Гц сила тока 50 мА первоначально получен декремент 6% от 1го к 3му ответы, далее декремент 44% на стимуляции частотой 50 Гц, далее декремент 83% на частоте 3 Гц, далее декремент 33%, далее 45%, далее отсутствие декремента (то есть получены феномены и посттетанического истощения и посттетанической фасилитации).
Диагноз: Семейная болезнь двигательного нейрона (боковой амиотрофический склероз, шейный дебют, сегментарно-ядерный вариант, быстрое прогрессированию – 21 баллов в год по шкале ALSFRSR). Нестабильность шейного отдела позвоночника. Внутренняя атрофическая гидроцефалия. Сочетанная генерализованная форма миастении, вероятная тимома переднего средостения. Респираторная аллергия. Дыхательная недостаточность 2 степени.
У больной выявлена мутация c.435G>C (p.145 Leu>Phe) CM 930687 NM_000454.4 в гене SOD1 в гетерозиготном состоянии. Ожидается генотипирование здоровых детей больной на эту мутацию.
Клинический случай № 3.
Больная А., 68 лет. Проживает в г. Каменско –Уральский Свердловской области. Жалуется на отсутствие речи, нарушение глотания жидкости и твердой пищи, снижение массы тела за время болезни (1,5 года) на 20 кг, слабость в руках и ногах, мышечные подергивания, слюнотечение, нарушение сна, плаксивость. В неврологическом статусе общемозговых и менингеальных симптомов нет, при оценке по Монреальской шкале когнитивных расстройств оценка 18 баллов (норма 26-30 баллов), нарушен тест на программирование, нарушено рисование часов, отмечается замедленная реакция на выполнение команд, имеются параграфии, персеверации, ошибки в сложных предложениях, нейродинамические нарушения, снижена слухо-речевая память и семантическая активность, не называет день недели, при этом узнавание, копирование, обобщение, называние не нарушены. Жевание ослаблено, парез круговой мышцы рта, язык в полости рта с фасцикуляциями и атрофиями, слюнотечение, парез мягкого нёба справа, оживлен мандибулярный рефлекс, рефлексы Маринеско с двух сторон, трипарез до 4 баллов в плечах и до 3 баллов в разгибателях правой стопы, атрофии мышц стоп, кистей, вызванные фасцикуляции мышц верхнего плечевого пояса, сухожильные рефлексы с рук и коленные оживлены, правый ахиллов снижен, левый средней живости, подошвенные рефлексы индифферентны, патологические кистевые рефлексы Якобсона-Ласка и Россолимо, живот немного втягивается на вдохе (парез диафрагмы), чувствительность и координация не нарушены. Диагноз: Болезнь мотонейрона, БАС, бульбарный дебют с трипарезом, алиментарная и дыхательная недостаточность, лобно-височные когнитивные экзекуторно-семантические нарушения.
Семейный анамнез.Мать больной также страдала бульбарным дебютом БАС с нарушениями речи, глотания, похуданием, слабостью в конечностях, умерла в возрасте 71 года. Больная имеет двух здоровых детей, сына 44 лет и дочь 39 лет.
У больной и ее здорового сына выявлена мутация в гене ANG в гетерозиготном состоянии c.208 A>G (p.70 Ile>Val) СM 060832 NM_001145.4. Мутаций в генах SOD1, FUS, VAPB, TARDBP не выявлено. Ген C9orf72 не исследовался. Гены SOD1 и VAPB у пациентов исследовались в Университете Умеа (Швеция), прочие – в России.
Клинический случай № 4.
Больной Г.,62 лет, проживает в г. Ижевск. В течение полугода отмечает слабость в плечах, ощущение подергиваний. При обследовании на МРТ шейного отдела позвоночника выявлена грыжа С5-6 и С6-7 до 3 мм. В неврологическом статусе общемозговых, менингеальных, когнитивных симптомов нет. Фон настроения снижен.Черепная иннервация в норме. Парез в дельтовидных мышцах и бицепсах до 2-3,5 баллов больше справа. Атрофии и фасцикуляции мышц верхнего плечевого пояса. Сухожильные рефлексы с рук снижены, с ног средней живости. Патологические кистевые рефлексы Якобсона и Россолимо. Чувствительных, координаторных и тазовых нарушений нет.
При игольчатой электромиографии выявляется спонтанная активность мышечных волокон и двигательных единиц в правой дельтовидной мышце и правой прямой мышце ведра с 4-5й стадией денервационно-реиннервационногопроцесса (ДРП).
Диагноз: Болезнь мотонейрона, БАС, шейный дебют, синдром Вульпиана-Бернардта, сегментарно-ядерный вариант, быстрое прогрессирование, ситуационная депрессия, остеохондроз шейного отдела позвоночника.
На приеме больной был вместе с братом, который настаивал на сокрытии диагноза, но при этом охотно оплатил молекулярно-генетическую диагностику.
У больного выявлена мутация гена TARDBP с.943 G>A (p.315 Ala>Thr) CM 081840 NM_007375.3 в гетерозиготном состоянии.
Семейный анамнез собрать не удалось. О результате генетического анализа мы сообщили по телефону брату больного, однако, тот, вероятно не понял наших аргументов о достоверном лабораторно-подтверждённом диагнозе БАС, сказав, что больному сделали операцию на шейном отделе позвоночника, и ему стало лучше. Дальнейший контакт с этой семьей был утрачен.
Клинический случай № 5.
Больной В., 43 лет, болен в течение двух лет. Болезнь началась со слабости в правом плече с постепенным переходом на кисть, затем на вторую руку, с последующим появлением скованности в ногах и нарушений ходьбы.В неврологическом статусе общемозговых, менингеальных, когнитивных симптомов нет.Черепная иннервация в норме, за исключением легкой дизартрии. Парез в дельтовидных мышцах и бицепсах до 2-3 баллов больше справа, до 3-4 баллов в сгибателях и, больше в разгибателях кистей, больше справа. Атрофии и фасцикуляции мышц верхнего плечевого пояса. Сухожильные рефлексы с рук оживлены, с ног клонические. Патологические кистевые рефлексы Якобсона и Россолимо, симптом Бабинского с дух сторон. Чувствительных, координаторных и тазовых нарушений нет.
При игольчатой электромиографии выявляется спонтанная активность мышечных волокон и двигательных единиц в правой дельтовидной мышце и правой прямой мышце ведра с 4-5й стадией ДРП в плечах и 3-Б стадией ДРП в нижних конечностях.
Диагноз: Болезнь мотонейрона, БАС, шейный дебют, синдром Вульпиана-Бернардта, классический вариант, прогрессирование ближе к медленному.
Семейный анамнез. Больной родом из Литвы в настояще время проживает в Швеции и преподаёт в университете. У больного двое детей 3 и 5 лет, они здоровы. Родителям больного 66 и 69 лет, нарушениями движений они не страдают. У матери больного есть сестра 71 года, у которой в Ярославле проживает дочь 37 лет. В течение 14 лет эта двоюродная сестра больного, пациентка Ш.. страдает медленно прогрессирующим двигательным дефицитом с преобладанием в ногах. По месту жительства ей выставлен диагноз полинейропатия.
При осмотре в неврологическом статусе общемозговых, менингеальных, когнитивных симптомов нет. Черепная иннервация в норме.Тетрапарез до 3 баллов в ягодицах, до 3,5-4 баллов в сгибателях и в большей степени в разгибателях стоп, больше справа, до 3-4,5 баллов в мышцах верхнего плечевого пояса, больше справа. Атрофии и фасцикуляции мышц верхнего плечевого пояса, ног. Сухожильные рефлексы с ног снижены, с рук оживлены. Патологические кистевые рефлексы Якобсона и Россолимо. Чувствительных, координаторных и тазовых нарушений нет. Одышка в положении стоя и лежа, лёжа живот втягивается внутрь, парадоксальное дыхание (парез диафрагмы).
При игольчатой электромиографии выявляется спонтанная активность мышечных волокон и двигательных единиц в правой прямой мышце ведра с 5-й стадией ДРП, в правой дельтовидной мышце с 4-й стадией ДРП. При спирографии форсированная жизненная ёмкость лёгких составила 54%.
Диагноз: Болезнь мотонейрона, прогрессирующая мышечная атрофия.
У больного А. выявлена мутация с гетерозиготном состоянии в гене VAPB. Анализ проводился в генетической лаборатории Университета Умеа (Швеция). Больная Ш. скончалась от дыхательной недостаточности через 3 недели после нашего осмотра, генетический анализ у неё взят не был. Наш соавтор профессор П.М.Андерсен (Университет Умеа) полагает, что каузативность данной мутации гена VAPB в настоящей семье не доказана, так как эта мутация не была выявлена у больной Ш. в силу того, что у неё не взяли анализ.
Обсуждение.
В настоящей работе освещается продолжение генетических исследований БАС нашей обновленной научной группой.
Мутация G17A гена SOD1 была впервые описана в португальской, а затем в японской семьях больных БАС (18). Клинические детали не сообщаются. Тем не менее, следует отметить, что двое пациенток с БАС, описанных в настоящей работе заболели в возрасте около 40 лет, и я них отмечался поясничный дебют БАС с продолжительностью жизни порядка 4-5 лет.
Мутация гена SOD1L144F была описана в первые годы обнаружения мутаций гена SOD1 при БАС. Впоследствии CorciaP. и соавт. описали семью с тремя больными с атипичным респираторным дебютом БАС и этой мутацией гена SOD1 (19). Интересно отметить, что мы поставили больной по результатам декремент-теста на электромиографии сочетанную миастению, и что у больной имела место вероятная тимома переднего средостения. Похожий случай описан в обзоре R.Bedlack по препарату Луназин в 2014 году у некоего мистера Мак Даффа, у которого за несколько лет до развития БАС имела место подтвержденная миастения, а впоследствии он заболел шейным дебютом и сегментарно-ядерным вариантом БАС, как и наша больная, с улучшением симптоматики после применения препарата Луназин (20). В настоящее время больная наблюдается в рамках Благотворительного фонда помощи больным БАС РФ, пользуется прибором неинвазивной вентиляции лёгких. От Луназина, который принимала в течение 6 месяцев, улучшений не было. Следует также отметить на указание на БАС в семейном анамнезе больной – мать больной умерла от попёрхивания (дебют неясен), а бабушка страдала нарушениями ходьбы, движений рук и дыхательными нарушениями, то есть вероятно поясничным дебютом БАС. Следовательно, можно сделать вывод о фенотипической гетерогенности БАС в данной семье, однако, респираторный дебют у матери больной сомнителен.
Клиническая картина БАС при мутациях в гене ANG очень разнообразна. На данные мутации приходится до 1% случаев семейного и спорадического БАС (21,22). Тем не менее, следует отметить, что обе описанные нами больные БАС с мутацией I70V страдали бульбарным дебютом и заболели в возрасте 65-70 лет, продолжительность жизни была 1,5-2 года. У осмотренной больной имели место лобно-височные когнитивные нарушения.
Мутации в гене TARDBP или TDP-43, TAR-ДНК связывающем белке, вызывают как случаи семейного, так и спорадического БАС, ассоциированные с наличием TARDBP-позитивных убиквитинированных / тау-негативных включений, при этом могут приводить к развитию случаев БАС с деменцией. Ген локализован на хромосоме 1р36.22, наследование мутаций происходит по АД типу (25). Мутации этого гена встречаются у 5-6% больных семейным БАС (2,23,24). Характерно более раннее начало болезни, шейный дебют, медленное прогрессирование (26). У некоторых больных развивается лобно-височная деменция. Описаны случаи лобно-височной деменции без БАС, ассоциированные с мутациями этого гена (26). Мутация, описанная нами, была ранее описана Corcia P. и соавт. в 2012 году, пациентка заболела шейным дебютом БАС в возрасте 50 лет, впоследствии у нее развилась лобно-височная деменция. У больного, описанного нами, также был шейный дебют БАС, более поздний возраст начала, не было когнитивных нарушений. Дальнейшая судьба данного пациента нам неизвестна в силу непонимания особенностей заболевания в его случае его родственниками.
Несмотря на отсутствие результатов анализа больной Ш. с прогрессирующей мышечной атрофией (ПМА), мы всё же хотели бы рассмотреть данный клинический пример и родословную больных с мутацией гена VAPB из России. Данный вид семейного БАС картирован к локусу 20q13.3 и описан на примере одной бразильской семьи (27). Начало болезни в возрасте 30-50 лет, развивается сегментарно-ядерный вариант БАС. У некоторых больных выявляются чувствительные нарушения, прогрессирование медленное, причиной является миссенс-мутация в гене VAPB. Мутации данного гена в ассоциации с БАС описаны и в некоторых других семьях, где встречались случаи быстропрогрессирующего БАС и спинальной амиотрофии взрослых (28). Таким образом, у наших пациентов с вероятным семейным БАС совпадают как возраст начала, вариант БАС, так и тип прогрессирования с описанными в литературе. Возможно, что у некоторых больных, описанных в мировой литературе, имела место классическая ПМА, то есть крайне медленно прогрессирующий сегментарно-ядерный вариант БАС с поясничным дебютом.
Генетические исследования семейного БАС в РФ будут продолжаться. Благотворительный фонд помощи больным БАС РФ организовал специальный проект «Наследие предков» для этой цели. Мы надеемся на появление новых клинических случаев и обнаружение мутаций в новых генах БАС в РФ в рамках данного проекта.
Авторы выражают благодарность депутату Государственной думы РФ от партии «Справедливая Россия» Алексею Алексеевичу Лысякову за спонсорскую помощь в проведении исследований гена C9orf72 в российской популяции. Также авторы выражают благодарность заведующем кафедрой неврологии и нейрогенетики Ярославской медицинской академии Спирину Николаю Николаевичу и доценту кафедры Касаткиной Елене Львовне, совместно с которыми была осмотрена больная Ш. из примера № 5 в настоящей публикации.
Список литературы
-
Andersen PM. Amyotrophic lateral sclerosis and Cu/Zn-superoxide dismutase. A clinical, genetic and enzymatic study. Doctoral thesis Umeå University: Umeå, Sweden, 1997.
-
Е.А.Кондратьева, П.А.Сломинский, М.И.Шадрина, Г.Н. Левицкийисоавт..Спорадический боковой амиотрофический склероз у пациентов с Asp90Ala мутацией медь-цинксодержащей супероксиддисмутазы в России. Журнневрологииипсихиатрииим. С.С.Корсакова, 2000, 100 (1): 44-47.
-
Skvortsova VI, Slominsky PA, Levitsky GN et al. Molecular genetic and biochemical studies of Russian patients with sporadic motor neuron disease. In:Amyotrophic lateral sclerosis: new research. Ed. C.Murray, Nova Biomedical books, New York, 2006;323-346.
-
Penco S, Schenone A, Bordo D et al. A SOD 1 gene mutation in a patient with slowly progressive familial ALS. Neurology 1999 Jul22;53(2) 404-6
-
В.И. Скворцова, С.А. Лимборская, П.А. Сломинский, Г.Н. Левицкий и соавт. Особенности спорадической болезни двигательного нейрона, ассоциированной с мутациями G12R и D90A в российской популяции. Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова, 2003, том 103 (11), стр. 46-52.
-
Brooks BR, Miller RG, Swash M, Munsat TL and Airlie House “Current Issues in ALS Therapeutic Trials” Workshop Contributors (1998). El Escorial Revisted: Revised Criteria for the Diagnosis of Amyotrophic Lateral Sclerosis. http://www.wfnals.org/Articles/elescorial1998.html (The WFN/ALS Website).
-
Neary D, Snowden JS, Gustafson L, et al. Frontotemporal lobar degeneration: a consensus on clinical diagnostic criteria. Neurology. 1998;51(6):1546–1554.
-
Hudson AJ. Amyotrophic lateral sclerosis: Clinical evidence of differences in pathology and pathogenesis. In Hudson AJ (ed). Amyotrophic lateral sclerosis. University of Toronto Press, Toronto, 1990, pp. 108-143.
-
Хондкариан О.А., Бунина Т.Л., Завалишин И.А. Боковой амиотрофический склероз. М., Медицина, 1978.
-
ALS online genetics database. http://alsod.iop.kcl.ac.uk/Als/index.aspx (на 6 декабря 2014 года).
-
Corcia P, Petiot P, Stevic Z et al. Respiratory onset in an ALS family with L144F SOD1 mutation.J NeurolNeurosurg Psychiatry. 2011 Jul;82(7):747-9.
-
http://www.alsportal.ru/latest-news/alsuntangledlunasin
-
Hand CK, Khoris J, Salachas F, et al. A novel locus for familial amyotrophic lateral sclerosis, on chromosome 18q. Am J HumGenet 2002; 70:251.
-
Chance PF, Rabin BA, Ryan SG, et al. Linkage of the gene for an autosomal dominant form of juvenile amyotrophic lateral sclerosis to chromosome 9q34. Am J HumGenet 1998; 62:633.
-
Sreedharan J, Blair IP, Tripathi VB, et al. TDP-43 mutations in familial and sporadic amyotrophic lateral sclerosis. Science 2008; 319:1668.
-
Corcia P, Valdmanis P, Millecamps S, et al. Phenotype and genotype analysis in amyotrophic lateral sclerosis with TARDBP gene mutations. Neurology 2012; 78:1519.
-
Nishimura AL, Mitne-Neto M, Silva HC, et al. A novel locus for late onset amyotrophic lateral sclerosis/motor neurone disease variant at 20q13. J MedGenet 2004; 41:315.
-
Nishimura AL, Mitne-Neto M, Silva HC, et al. A mutation in the vesicle-trafficking protein VAPB causes late-onset spinal muscular atrophy and amyotrophic lateral sclerosis. Am J HumGenet 2004; 75:822.